病毒滅活試驗是什么 科普病毒滅活試驗的準備工作
公司簡介
健明迪檢測提供的病毒滅活試驗是什么 科普病毒滅活試驗的準備工作，病毒是可引發疾病的微生物，比細菌小，由蛋白質外殼、包膜和含有DNA或RNA的內核構成，病毒依靠活細胞實現自我復制。而宣稱能消毒的各式空氣凈化器、消毒器械、消毒劑及具有抗病毒功效的口罩、紡織品等產品或材料，是否能夠達標消毒或抗毒的標準，無一不需要經過病毒滅活試驗。本文特此探討健明迪檢測實驗室是如何進行病毒滅活試驗的。
病毒滅活試驗的滴度計算方法
(1)終點稀釋法病毒感染滴度的計算
以半數細胞感染劑量(TCID50)表示。TCID50的對數值計算公式如下。
TCID50對數值=病變率高于50%組稀釋度的對數值＋距離比例
(2)噬斑法病毒感染滴度的計算
噬斑法病毒感染滴度，以噬斑形成單位數（ pfu)，簡稱噬斑數表示。計數方法同活菌培養計數技術。
每毫升測試樣品中的病毒含量計算（pfu/ml）=平板平均噬斑數×稀釋倍數
(3)平均滅活對數值的計算
平均滅活對數值按下式計算：設陽性（病毒）對照組平均病毒感染滴度（TCID50或pfu）的為No，試驗（消毒)組平均病毒感染滴度（TCI,50或pfu）為Nx。
平均滅活對數值= log No—log Nx
更多病毒殺滅試驗的問題可咨詢健明迪檢測。
病毒滅活試驗的病毒懸液制備
(1)從液氮中取出凍存的試驗用宿主細胞，在37℃溫水中迅速融化，用毛細吸管移植于含有細胞維持液的細胞管內，吹吸數次，使混勻，立即離心(3000r/min，3min)，去上清液。再加入適當的細胞維持液，吹吸數次，使混勻，同上離心后，轉種于加有10ml完全培養基的培養瓶中。逐日觀察細胞生長情況，在細胞長滿單層時，用于消毒試驗。
(2）取出低溫凍存的試驗病毒毒種，37℃水浴融化，用細胞維持液作10倍稀釋，然后接種于已經長滿單層細胞的細胞瓶內，置37℃溫箱中，使與細胞吸附、生長。逐日觀察病變，待3/4細胞出現病變時，收獲病毒。
(3）將含有病毒及宿主細胞的培養液，在冰浴條件下，用超聲波（或反復凍融）破碎宿主細胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000r/min，15min）去除沉淀（主要為細胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1.Oml分裝于無菌離心管(1.5ml)中-
(4)取1支病毒懸液，按病毒滴度測定法，測定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80℃備用。
試驗器材
(1)試驗用病毒株：脊髓灰質炎病毒1型(poliovirus-Ⅰ ,PV-Ⅰ)疫苗株；艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)美國株。
(2)宿主細胞：可采用VERO細胞系、BGM細胞、Hela細胞系或FL細胞系，作為PV-1的測試細胞。用含有人T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ型( human T cell leukemiavirus 1，HTLV-1)基因的人淋巴細胞(MT4株)作為HIV-1的測試細胞。
(3)細胞培養瓶與96孔培養板。(4)恒溫水浴箱。
(5)二氧化碳培養箱。
(6)層流超凈工作臺。
(7)低溫冰箱(-20℃，-80℃)。
(8)液蠶罐。
(9)倒置顯微鏡。
(10)離心機。
(11)可調移液器及配套一次性塑料吸頭。
(12)細胞維持培養基。
(13)細胞完全培養基。
(14)去離子水。
病毒滅活試驗的適用范圍
主要適用于消毒產品鑒定或日常監測。用具有一定代表性的、活的病毒及其細胞感染技術，評價各種用途的消毒因子對測試病毒的殺滅效果。按此方法進行的試驗，只是對消毒因子的滅活病毒能力的重要方面進行驗證。
病毒滅活試驗的 病毒是可引發疾病的微生物，比細菌小，由蛋白質外殼、包膜和含有DNA或RNA的內核構成，病毒依靠活細胞實現自我復制。而宣稱能消毒的各式空氣凈化器、消毒器械、消毒劑及具有抗病毒功效的口罩、紡織品等產品或材料，是否能夠達標消毒或抗毒的標準，無一不需要經過病毒滅活試驗。本文特此探討健明迪檢測實驗室是如何進行病毒滅活試驗的。
(1)終點稀釋法病毒感染滴度的計算
以半數細胞感染劑量(TCID50)表示。TCID50的對數值計算公式如下。
TCID50對數值=病變率高于50%組稀釋度的對數值＋距離比例
(2)噬斑法病毒感染滴度的計算
噬斑法病毒感染滴度，以噬斑形成單位數（ pfu)，簡稱噬斑數表示。計數方法同活菌培養計數技術。
每毫升測試樣品中的病毒含量計算（pfu/ml）=平板平均噬斑數×稀釋倍數
(3)平均滅活對數值的計算
平均滅活對數值按下式計算：設陽性（病毒）對照組平均病毒感染滴度（TCID50或pfu）的為No，試驗（消毒)組平均病毒感染滴度（TCI,50或pfu）為Nx。
平均滅活對數值= log No—log Nx
更多病毒殺滅試驗的問題可咨詢健明迪檢測。
病毒滅活試驗的病毒懸液制備
(1)從液氮中取出凍存的試驗用宿主細胞，在37℃溫水中迅速融化，用毛細吸管移植于含有細胞維持液的細胞管內，吹吸數次，使混勻，立即離心(3000r/min，3min)，去上清液。再加入適當的細胞維持液，吹吸數次，使混勻，同上離心后，轉種于加有10ml完全培養基的培養瓶中。逐日觀察細胞生長情況，在細胞長滿單層時，用于消毒試驗。
(2）取出低溫凍存的試驗病毒毒種，37℃水浴融化，用細胞維持液作10倍稀釋，然后接種于已經長滿單層細胞的細胞瓶內，置37℃溫箱中，使與細胞吸附、生長。逐日觀察病變，待3/4細胞出現病變時，收獲病毒。
(3）將含有病毒及宿主細胞的培養液，在冰浴條件下，用超聲波（或反復凍融）破碎宿主細胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000r/min，15min）去除沉淀（主要為細胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1.Oml分裝于無菌離心管(1.5ml)中-
(4)取1支病毒懸液，按病毒滴度測定法，測定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80℃備用。
試驗器材
(1)試驗用病毒株：脊髓灰質炎病毒1型(poliovirus-Ⅰ ,PV-Ⅰ)疫苗株；艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)美國株。
(2)宿主細胞：可采用VERO細胞系、BGM細胞、Hela細胞系或FL細胞系，作為PV-1的測試細胞。用含有人T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ型( human T cell leukemiavirus 1，HTLV-1)基因的人淋巴細胞(MT4株)作為HIV-1的測試細胞。
(3)細胞培養瓶與96孔培養板。(4)恒溫水浴箱。
(5)二氧化碳培養箱。
(6)層流超凈工作臺。
(7)低溫冰箱(-20℃，-80℃)。
(8)液蠶罐。
(9)倒置顯微鏡。
(10)離心機。
(11)可調移液器及配套一次性塑料吸頭。
(12)細胞維持培養基。
(13)細胞完全培養基。
(14)去離子水。
病毒滅活試驗的適用范圍
主要適用于消毒產品鑒定或日常監測。用具有一定代表性的、活的病毒及其細胞感染技術，評價各種用途的消毒因子對測試病毒的殺滅效果。按此方法進行的試驗，只是對消毒因子的滅活病毒能力的重要方面進行驗證。
病毒滅活試驗的 病毒是可引發疾病的微生物，比細菌小，由蛋白質外殼、包膜和含有DNA或RNA的內核構成，病毒依靠活細胞實現自我復制。而宣稱能消毒的各式空氣凈化器、消毒器械、消毒劑及具有抗病毒功效的口罩、紡織品等產品或材料，是否能夠達標消毒或抗毒的標準，無一不需要經過病毒滅活試驗。本文特此探討健明迪檢測實驗室是如何進行病毒滅活試驗的。
