動(dòng)物癥狀觀察：

表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個(gè)月后死亡。

實(shí)驗(yàn)中涉及動(dòng)物的操作程序已經(jīng)得到中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用與管理委員會(huì)的批準(zhǔn)(ILAS-GC-2012-001)。

1.術(shù)中心電圖：如結(jié)扎成功，心電圖將會(huì)出現(xiàn)ST段抬高。

2.再灌注28天彩超

假手術(shù)組心室大小正常，前壁運(yùn)動(dòng)良好，手術(shù)組心室明顯擴(kuò)大，前壁幾乎無(wú)運(yùn)動(dòng)。

3.再灌注24小時(shí)心肌梗死面積

4.再灌注28天masson染色

1.SD大鼠 ，名稱(chēng)：SS/JrHsdMcwiCrlVr，近交系（Inbred Rat）

品系來(lái)源 ：動(dòng)物來(lái)源：由美國(guó)的Sprague & Dawley農(nóng)場(chǎng)的R.W.Dawley用雜合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠雜交后育成的一個(gè)白化封閉群大鼠，1950年傳入美國(guó)的癌癥研究所（CRL），1955年進(jìn)行生物凈化，1964年傳入美國(guó)各地，同時(shí)傳入法國(guó)。1992年自美國(guó)NIH引入到中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。 動(dòng)物外部特征：白化 遺傳基本組成：遠(yuǎn)交群大鼠 種群數(shù)：核心群35對(duì)，增殖群100對(duì) 特點(diǎn)：生長(zhǎng)快，繁育性能好，大多用于安全性試驗(yàn)及營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)發(fā)育有關(guān)的研究。該品系對(duì)性激素敏感，對(duì)呼吸道疾病有較強(qiáng)的抵抗力。

2.心肌缺血/再灌注損傷大對(duì)照鼠SS-13BN Rat，名稱(chēng)：SS-Chr13BN/McwiCrlVr，

?同類(lèi)系（Consomic Rat）

3.誘導(dǎo)方法

1）大鼠稱(chēng)重后，使用2%戊巴比妥（用生理鹽水配置），按0.3ml/100g體重經(jīng)腹腔麻醉。根據(jù)大鼠四肢肌張力確定麻醉良好后，仰位固定大鼠于手術(shù)臺(tái)上，頸前區(qū)及心前區(qū)剃毛。

2）頸前區(qū)消毒，剪開(kāi)頸部正中皮膚，分離組織，沿氣管方向進(jìn)行氣管插管，氣管導(dǎo)管接呼吸機(jī)，參數(shù)設(shè)置：潮氣量 2ml/100g體重，頻率55-60次/min，吸呼比 1：1。

3）心前區(qū)消毒，于胸骨左緣第四肋水平剪開(kāi)長(zhǎng)約2cm的水平切口，鈍性分離皮膚與肌肉，于胸骨左緣第 4 肋間隙開(kāi)胸，剝開(kāi)心包，暴露心臟，在肺動(dòng)脈圓錐與左心耳之間，隱約可見(jiàn)心肌層下面細(xì)小、透亮、粉紅左主冠狀動(dòng)脈前降支。

4）無(wú)創(chuàng)小圓針5-0絲線在左心耳下緣前降支左側(cè)進(jìn)針，進(jìn)針深度控制在 1mm，寬度為3mm 左右，器械打一活結(jié)，造成暫時(shí)心肌缺血，45min 后松開(kāi)絲線恢復(fù)冠脈血流。假手術(shù)組左主冠狀動(dòng)脈僅穿線不結(jié)扎。

5）通過(guò)肉眼觀察結(jié)扎前后左室前壁的局部顏色變化，判斷模型是否成功。結(jié)扎成功時(shí)，可見(jiàn)受累左室局部瞬間蒼白，隨即發(fā)紺、腫脹以及收縮力下降，成功再灌注時(shí)數(shù)秒內(nèi)左室局部迅速充血，缺血心肌顏色由暗紅變?yōu)轷r紅。

6）依次縫合關(guān)閉肋間隙，肌肉，以及皮膚，酒精消毒皮膚。觀察大鼠直至蘇醒。

近年來(lái)隨著動(dòng)脈搭橋術(shù)、溶栓療法、經(jīng)皮腔內(nèi)冠脈血管形成術(shù)、心臟外科體外循環(huán)等方法的推廣應(yīng)用，使心肌梗死后重新得到血液再灌注。多數(shù)情況下，缺血后再灌注可以使心肌功能恢復(fù)，但有時(shí)不僅不能改善心肌功能，反而加重心肌細(xì)胞的損傷，即心肌缺血再灌注損傷（myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI）。然而心肌梗死最主要的治法仍是血管再通、恢復(fù)心肌細(xì)胞的血流供應(yīng)，如何預(yù)防缺血再灌注的損傷仍是目前待解決的問(wèn)題。

MIRI的發(fā)病機(jī)制尚未徹底闡明，目前認(rèn)為自由基的作用、細(xì)胞內(nèi)鈣超載及白細(xì)胞的激活是缺血再灌注損傷的重要發(fā)病環(huán)節(jié)。[1]當(dāng)組織細(xì)胞缺血缺氧時(shí)OFR清除系統(tǒng)功能降低或喪失，而生成氧自由基的系統(tǒng)活性卻增強(qiáng)，一旦恢復(fù)組織血液供應(yīng)和供氧，OFR便會(huì)出現(xiàn)大量且急劇的堆積，其會(huì)以不同方式造成細(xì)胞急性或慢性損傷。[2]細(xì)胞內(nèi)鈣超載引起的損傷機(jī)制與以下幾點(diǎn)有關(guān)①大量鈣離子涌入細(xì)胞，觸發(fā)線粒體、肌漿網(wǎng)攝取鈣離子，從而消耗大量ATP，同時(shí)鈣離子形成不溶性的磷酸鈣，抑制線粒體ATP合成，加重細(xì)胞能量代謝障礙，[3] ②胞內(nèi)鈣離子增多，則鈣依賴(lài)性蛋白酶活性增強(qiáng)，后者使黃嘌呤脫氫酶轉(zhuǎn)化為黃嘌呤氧化酶，從而增加氧自由基生成。③胞內(nèi)鈣離子升高，可激活某些ATP酶，從而水解細(xì)胞高能磷酸鹽，產(chǎn)生大量的氫離子加重細(xì)胞內(nèi)酸中毒。④鈣離子增多還能激活磷脂酶類(lèi)，使膜磷脂降解，導(dǎo)致細(xì)胞膜及細(xì)胞器膜受損。 [4] 白細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞在缺血組織聚集浸潤(rùn)，對(duì)心肌缺血及再灌注損傷的發(fā)生及嚴(yán)重程度起到了重要作用[5,6]激活的中性粒細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放大量的致炎物質(zhì)，如自由基、蛋白酶、溶酶體等，不但改變了自身結(jié)構(gòu)和功能，而且造成周?chē)M織細(xì)胞損傷。